Иммуноблот на ВИЧ: случаи ошибок, может ли ошибаться, анализ

Аргументы Недели → Здоровье → Здоровая жизнь 13+

3 марта 2020, 12:09

Иммуноблот на ВИЧ: случаи ошибок, может ли ошибаться, анализ ложноположительный тест на вич, pixabay.com

Мировая статистика насчитывает боле 38 миллионов человек с ВИЧ-инфекцией. Как бы страшно не звучали эти цифры – с каждым годом болезнь поддается лечению.

Средства защиты, профилактики, специальные препараты обеспечивают счастливую и длинную жизнь ВИЧ-инфицированному населению. Больше всего болезнь превалирует в странах со средним и низким уровнем жизни.

В ВИЧ рейтинг входят государства Центральной Азии, Восточной Европы, Африки, Ближнего Востока.

Некоторые люди, узнав о том, что заражены ВИЧ инфекцией совершают самоубийства. Бывают случаи, когда человек еще точно не знает, болен он или нет, но уже приговаривает себя к смерти.

Но каждый должен знать: жизнь одна и со всем можно и нужно бороться.

Часто даже самые лучшие приборы, клиники и специалисты могут допустить погрешность. Поэтому вероятность ошибки анализа на ВИЧ – есть.

Если вы собрались сдать анализы вместе со своим половым партнером, то вам необходимо знать информацию указанную в статье. Сегодня мы дадим ответ на следующие вопросы:

Что влияет на анализы ВИЧ. Как подготовиться к сдаче?
Статистика ложноположительных анализов на ВИЧ.
Ложный анализ на ВИЧ причины.
ВИЧ положительный, что это значит?
Ложный анализ на ВИЧ, кто виноват?

Врачи считают, что к ключевым группам ВИЧ больных относятся:

«Геи, трансгенедеры, наркоманы, заключенные тюрьмы. Люди, работающие в сфере секс услуг. Как правило, они совершенно не соблюдают гигиену. Да и про какую гигиену может идти речь, если мозг решает только потребность влечения. От ВИЧ эпидемии страдают женщины и подростки африканских стран. Поскольку уровень держав не позволяет проводить должное лечение. Статистика умирающих от ВИЧ растет.

Не стоит забывать, что эта страшная болезнь, прежде всего влияет на сильное падение иммунитета. К сожалению, лекарств, которые быстро избавят от проблемы не существует.

Но современные препараты АРВ способны контролировать уровень заражения организма. Удерживать его и не давать прогрессировать. Так же, защитить окружающее общество от заражения. Будьте бдительны и внимательны при выборе полового партнера.

Лучше пройдите совместное исследование, чтобы точно быть уверенным в здоровье друг друга».

Могут ли быть ошибочные анализы на ВИЧ?

Чтобы не допустить ложный анализ на ВИЧ, к исследованию надо правильно подготовиться. Нередко результаты могут шокировать пациента, без видимых причин и показать, что он является ВИЧ-инфицированным. Такая ошибка называется ложноположительный анализ. Есть 2 метода сдачи показателей на ВИЧ. Каждый имеет свою статистику ошибочных результатов.

Иммуннохроматографический – тест полоски. Допустимость погрешности или ошибки 5%.
ИФА – 0.8-0.9 %.

Конечно процент, что это промах – невысок. Тем не менее, такое случается. Врачи рекомендуют следовать нескольким правилам, чтобы точно уберечь себя от лишних переживаний и депрессии.

Первая процедура — это сдача венозной крови. Вам обработают место, откуда будут брать кровь, введут пипеточный шприц и заберут нужное количество крови. Кровь могут взять, как из локтевой ямы, так и из предплечья. Не многие знают, что перед забором крови кушать категорически нельзя. Почему? – микроэлементы пищи всасываются в тонкий кишечник. От этого меняется состав крови. Стоит также отказаться от жирной еды в вечернее время, если утром на анализ. Жиры делают кровь мутнее, и возникает хилез. Меняется и уровень гормонов, который очень влияет на результат. Постарайтесь не кушать за 8-14 часов до процедуры, а пить можно в обычном режиме. После сдачи угостите себя шоколадкой.

Забудьте про сигареты за 8 часов до сдачи. Никотин понижает гормон стресса и количество необходимых веществ. Алкоголь надо оставить на полочке за 3 дня до анализов. Он замедляет метаболизм и негативно скажется на результате.
Ложноположительная реакция на ВИЧ может возникнуть из-за вирусных болезней: ОРВИ, грипп. В организме происходит синтез антител. Именно антитела в борьбе против вируса могут распознаваться, как бактерии против ВИЧ-инфекции. Не проходите исследование, если заболели или болеете. После болезни сдать кровь на ВИЧ можно через 1 неделю.
Моральный страх будет. Когда вопрос касается серьезного заболевания, нам становится страшно. Люди откладывают обращение к врачу и еще больше рискуют своей жизнью. Поэтому если у вас есть подозрения, что инфекция оказалась в организме – забудьте про все и срочно сдайте анализы. Если никаких предпосылок волноваться нет, то спокойно, ради уверенности пройдите обследование.

Статистика, результаты ИФА на ВИЧ

Реакция на ВИЧ у каждого проявляется по-разному. Иногда, люди годами могут не знать о тяжелом заболевании, а после оно резко бьет по иммунной системе.

Неутешительная статистика все больше пугает здоровую часть мирового населения, поскольку с каждым годом растет.

Африканский регион ВОЗ имеет 25.7 миллионов граждан, которые являются переносчиками ВИЧ. Это 2/3 инфицированных от всех болеющих.
Оценивая статистику 2018 года: только 79% людей знали о болезни. 62% проходили лечение и антивирусную терапию. У 53% вирус удалось ослабить и избежать риска заражения других людей.
На 2019 год антивирусную терапию использовали 24.5 миллион человек.
С 2000 по 2018 год смертность от ВИЧ снизилась на 45%. Тем не менее, АРТ спасло 13.6 миллионов граждан различных стран.
Ложноположительный результат на ВИЧ случается в 5% случаев, если это тест полоски. Если это ИФА, то процент снижается до 1.

Ошибочный результат на ВИЧ, причины

Современная медицина с каждым годом совершенствуется и не дает шансы иметь место ошибкам. Но по ряду различных причин ошибки случаются, при этом очень пугают, а после и радуют пациентов. Результаты анализов зависят от:

Человека, который сдает тест на ВИЧ.
От работы лаборатории и опыта врачей.
От аппаратной техники.

Иногда, виной появлению седых волос становятся технические ошибки. Неопытные медсестры и работники клиник могут не соблюдать режим хранения и транспортировки крови, взятой на анализ. Но такое случается все реже

Ложноположительный анализ у женщин может появляться из-за беременности. Если у беременной анализ показал положительный статус, ей необходимо встать на учет в СПИД-диспансер.

Там проведут обследование и повторную сдачу. Через 3 месяца после первой сдачи крови, проводится вторая. Если показатели антител растут, значит это ВИЧ.

Остается прежним – последствия беременности, и бояться нечего.

Сахарный диабет, коллагеноз – тоже причины неправильных показателей. На правильность результатов повлияет наличие онкологии или аутоиммунные болезни.

Ложный результат ВИЧ бывает и у детей. Женщины, которые имеют инфекцию, могут родить здорового ребенка. НО. Первые 18 месяцев в его крови будет повышенный показатель антител. Если дальше показатели пойдут на спад – ВИЧ нет.

На причины ложноположительного анализа на ВИЧ может повлиять еще несколько факторов:

Стресс, переутомление.
Неправильное питание, а как последствие – нарушение гормонального фона.
Тяжелая физическая нагрузка вызывает синтез гормона стресса. Перед исследованием стоит воздержаться от спорта.

Может ли анализ на ВИЧ быть ложноположительным и когда его надо сдавать?

Сдать анализ и остаться анонимным пациентом, человек имеют право в любое время. Но с такой осторожностью к своему здоровью относится совсем маленький процент людей. Чаще всего, мы бежим лечиться, когда уже заболели. Но есть ряд ситуаций, которые обязывают пройти проверку для уверенности и своевременного назначения лечения.

Сдавайте кровь перед запланированной беременностью.
Перед любой хирургической операцией.
После проколов кожи или сомнительных, нестерильных инъекций.
После полового контакта с малознакомым мужчиной/женщиной.
Если чувствуете себя намного хуже, чем обычно, но видимых причин не находите.

Более того, все клиники, всех стран проводят анализ совершенно бесплатно. Врачи и медицинские учреждения приветствуют ответственных молодых людей.

Также, вы имеете право рассчитывать на полную конфиденциальность. Вы можете не называть своего имени, или назвать только имя. В первом случаи вам вручат порядковый номер.

Результаты анализов будут выданы только вам. Разглашение показателей анализа, считается нарушением врачебной тайны. Строго карается увольнением и полным отстранением от врачебной работы.

Поэтому анонимность – точно обеспечена.

Мы рекомендуем проходить проверку 2 раза в год. Обращать внимание на общее физическое и психологическое состояние. Быть ответственным за свое здоровье, использовать методы контрацепции. Будьте здоровы и счастливы!

Подписывайтесь на Аргументы недели: Яндекс Новости | Яндекс Дзен | Telegram

Политика

Иммуноблот на ВИЧ: случаи ошибок, может ли ошибаться, анализ

Политика

В мире

Общество

Политика

В мире

Политика

История

Политика

Общество

Армия

Общество

Ложноположительный результат анализа на ВИЧ-инфекцию

19.12.2019

Диагноз ВИЧ-инфекции не может быть установлен на основании одного результата анализа, так как в этом случае существует вероятность ошибки.

Ложноположительным результатом является положительный результат анализа на ВИЧ у человека, не инфицированного вирусом иммунодефицита.

Получение такого результата анализа может привести к серьезным последствиям для пациента и ошибочным рекомендациям со стороны врача.

Именно поэтому процесс диагностики ВИЧ-инфекции и постановка непосредственно диагноза подчинены очень строгому алгоритму, который не допускает ошибок.

Исследовать кровь на ВИЧ можно исключительно с помощью тестов, сертифицированных для применения в конкретной стране. Двумя важными характеристиками всех тестов являются специфичность и чувствительность.

Чувствительность теста отражает долю положительных результатов, которые определяет тест у пациентов, инфицированных ВИЧ. Специфичность же, наоборот, отражает долю отрицательных результатов теста у здоровых людей.

Как правило, тесты на ВИЧ-инфекцию обладают высокой специфичностью – это значит, что может присутствовать очень малое количество ложноположительных результатов, и подавляющее большинство неинфицированных пациентов все же имеет отрицательный результата анализа.

К примеру, если провести тестирование 1000 неинфицированных людей и будет получено 4 положительных результата, это говорит о специфичности теста 99,6% (996 достоверно негативных результата на 1000 протестированных человек).

Причиной ложноположительного результата могут быть технические проблемы, связанные с самим тестом или с биологическим материалом.

Технические проблемы включают в себя перепутывание образцов, неправильную маркировку, неправильное обращение и интерпретацию визуально считываемого результата экспресс-тестов.

К биологическим причинам можно отнести участие в исследовании вакцины против ВИЧ и такие медицинские состояния, как: • инфекция, вызванная вирусом Эпштейна-Барр (ВЭБ); • беременность; • получение иммуноглобулина; • гипербилирубинемия; • аутоимунные заболевания; • недавняя вакцинация.

В основе механизма формирования реактивного результата теста при данных состояниях, как правило, лежит неверное распознавание тестами антител, которые не связаны с ВИЧ и появились в нашем организме в ответ на внедрение других антигенов, а распознаются как антитела к вирусу иммунодефицита.

Надлежащей практикой, рекомендованной ВОЗ, является проведение повторного тестирования всех людей с первоначально положительным результатом для исключения каких-либо потенциальных ошибок в тестировании или отчетности.

Когда при скрининге получен положительный результат анализа на ВИЧ (такой результат называют реактивным), необходимо проведение дополнительного обследования для того, чтобы установить, является ли положительный результат истинным или ложным.

Если положительный результат получен при выполнении экспресс-теста, то требуется соблюдение рекомендованного ВОЗ алгоритма исследования–последовательное использование нескольких тест-систем разных производителей.

Если при последовательном проведении разных экспресс-тестов первоначальный результат положительный, а последующий нет, необходимо лабораторное до обследование для исключения ранней инфекции. Прогностическая ценность проведения дополнительно 2-3 тестов подряд стремится к 100%.

Если же реактивный результат получен при тестировании в лаборатории, сотрудники лаборатории самостоятельно дообследуют сыворотку крови по алгоритму, описанному в предыдущей статье. При получении лабораторного подтверждения ВИЧ-инфекции пациенту необходимо обратиться в региональный центр СПИДа для наблюдения у инфекциониста и начала АРТ.

При получении отрицательного результата можно говорить о том, что предыдущий тест был ложнопозитивным и следует разобраться, что явилось причиной получения такого результата. Возможно необходимо дообследование для выявления одного из вышеуказанных медицинских состояний (аутоиммунные заболевания и т.д.). Если второй результат лабораторного исследования отрицательный, но у человека есть сомнения в его достоверности (например, у людей в группах высокого риска передачи ВИЧ), то необходимо проведение повторного тестирования через 6 недель от первоначального для исключения «периода окна» – это период, когда инфицирование вирусом произошло, но антитела к нему еще не сформировались. В такой период возможно получение другого недостоверного результата – ложноотрицательного.

После того, как диагноз ВИЧ-инфекции был установлен, и начато лечение, тестирование на антитела повторять не стоит.

При проведении скрининговых исследований следует учитывать, что распространенность ВИЧ-инфекции в отдельных регионах так же может влиять на количество ложноположительных результатов.

Распространенность ВИЧ отображает долю людей, живущих с ВИЧ-инфекцией (ЛЖВ) на конкретной территории, и влияет на количество ложноположительных результатов в зависимости от достоверно положительных.

При высокой распространенности (2%), если протестировать 10000 человек, то 200 образцов будет получено от ЛЖВ (истинно-положительные) и 9800 от неинфицированных людей. Учитывая специфичность теста 99,8%, около 20 образцов будет ложноположительными. В этом случае из 220 положительных результатов 91% людей фактически инфицированы ВИЧ.

Количество достоверно положительных результатов значительно превышает количество ложных. При низкой распространенности (0,1%) только 10 образцов из 10000 будут истинно-положительными, в то время как 9990 образцов будут от неинфицированных людей. Учитывая специфичность теста (99,8%) – 20 образцов будет ложнопозитивными.

В этом случае из 30 положительных результатов только 33% людей будут инфицированы и количество ложноположительных результатов превысит количество истинных. При проведении скрининговых программ в популяциях с низкой распространенностью ВИЧ-инфекции следует ожидать, что количество ложнопозитивных результатов будет преобладать над истинно положительными.

Не стоит забывать о методах профилактики инфицирования ВИЧ после получения отрицательного результата.

К ним относятся: — использование презерватива во время сексуальных контактов (избегать использования лубрикантов на масляной основе); — регулярное тестирование на ВИЧ; — при употреблении инъекционных наркотиков использовать стерильные шприцы/иглы и отказ от совместного использования их с другими потребителями; — прием препаратов доконтактной профилактики (ДКП) в группах высокого риска и препаратов постконтактной профилактики (ПКП) после аварийной ситуации (начать прием ПКП необходимо как можно раньше, насколько это возможно, и не позднее 72часов после контакта); — мужское обрезание (ВОЗ указывает на снижение риска получения ВИЧ при гетеросексуальных контактах до 60%); — обследование беременных и начало АРТ при получении положительного результата.

врач Университетской клиники H-Clinic Коновалова Анастасия Александровна

Медицинский редактор: руководитель Университетской клиники, к.м.н., врач-инфекционист Коннов Данила Сергеевич

Возврат к списку

Мгц спид — окончательный диагноз. когда у анализа на вич ложный результат?

На точность анализа на ВИЧ влияют диеты, гормоны и инфекции.

1 декабря — Всемирный день борьбы со СПИДом. В канун этой даты Министерство здравоохранения России привело пугающую статистику, согласно которой количество заболевших всего лишь через 15 лет вырастет в 2,5 раза.

Профилактика ВИЧ сейчас — одно из основных направлений современной медицины, нацеленное на приостановку распространения вируса. И, в первую очередь, начинать нужно с анализов. АиФ.

ru выяснил, где можно пройти исследование на ВИЧ, и как это правильно делать, чтобы не получить ложный результат.

Два вида проверки

Есть два основных вида анализов на ВИЧ/СПИД: иммуноферментный анализ и ПЦР-диагностика. Оба информативны и точны.

Иммуноферментный анализ сегодня максимально распространен. Он основывается на выявлении в сыворотке крови пациента антител к ВИЧ. У большей части больных они появляются примерно через 4-6 недель после заражения, у 10% — через 3-6 месяцев, и у 5% — позднее. Поэтому в идеале, этот анализ следует сдавать три раза через каждые 3 месяца.

ПЦР-диагностика — это исследование при помощи полимеразной цепной реакции, которая может проверять сыворотку крови, противовирусную-РНК или ДНК, количественную оценку CD-4-лимфоцитов.

При этом ПЦР-анализ медики часто называют единственной возможной ранней диагностикой ВИЧ-инфекции, которую проводят, в том числе и у малышей первого года жизни.

Преимуществом такого метода исследования является и тот факт, что с ним можно выявлять вирус в инкубационном и раннем клиническом периоде, когда в крови еще нет антител. Это помогает раньше начать лечение и снизить негативное воздействие болезни.

Как готовиться?

К анализу на ВИЧ/СПИД нужно подготовиться. Сдавать кровь следует натощак, при этом последний прием пищи должен состояться не позднее, чем за 8 часов. Естественно, рекомендуется выдержать и своеобразную диету, отказавшись за несколько дней до сдачи крови от алкоголя и «вредных» блюд — жирных, жареных, копченостей, маринадов и прочих рафинированных продуктов.

Стоит учитывать, что если вы недомогаете, даже при любом вирусном или инфекционном заболевании, кровь лучше не сдавать или прийти на анализ повторно через 35-40 дней после выздоровления. В противном случае есть риск получить ложноположительный результат.

Анализ на ВИЧ/СПИД проходит несколько этапов проверки. Поэтому готовят его 2-10 дней.

Отрицательный плюс

Результат может быть положительным, отрицательным и сомнительным. В последнем случае стоит пересдать анализ несколько позднее.

Медики утверждают, что при положительном результате сразу же заявлять, что у человека ВИЧ или СПИД, нельзя. Ведь в ряде случаев показатели могут быть завышены по другим причинам. В этой ситуации следует пересдать анализ повторно — через такую процедуру проходят все, у кого результат оказался со знаком «+».

Откуда берется «ложный сигнал»? Из-за некоторых заболеваний и состояний, которые могут стать причиной перекрестных реакций. Например, из-за аллергии в крови могут вырабатываться непонятные для организма антигены, которые он распознает как чужеродные.

Также похожая реакция могут произойти из-за резкого изменения состава крови — например, вследствие скачка холестерина (при избыточном употреблении жирной пищи, жареных блюд, семечек), гормонального дисбаланса ( в частности, в период месячных у женщин), инфекций (болезни дыхательных путей, наличие вирусов гепатита и гриппа, недавно сделанные прививки, туберкулез), чрезмерной густоты крови артрита, онкологии. Грибки, вирусы и бактерии тоже могут способствовать появлению неверных данных. Кроме того, ложноположительный результат может появиться из-за врачебных ошибок: при нарушении правил забора и транспортировки крови, использовании некачественной сыворотки и неправильном хранении материала.

Степени анонимности

Сдать анализ на вирус иммунодефицита при желании можно в любое время. Однако есть ряд положений, когда сделать это рекомендуется. Так, стоит сдать кровь при планировании беременности, перед плановой операцией, после проведения сомнительных инъекций, незащищенного полового контакта с малознакомым человеком, при резком ухудшении самочувствия.

Провериться можно в любой поликлинике, частных клиниках и диагностических центрах, а также специализированных центрах СПИДа. Причем в государственных медучреждениях эта процедура будет совершенно бесплатной. Сдавать анализы в центре СПИДа может любой гражданин страны, независимо от того, где он проживает.

Тестирование бывает 2-х видов: конфиденциальное и анонимное. В первом случае человек называет лаборантам свое имя. Во втором случае ему присваивают идентификационный номер.

Все результаты выдаются исключительно на руки пациенту, и даже при положительном результате лаборатория не может никуда сообщить — это будет расцениваться как нарушение врачебной тайны.

В платных клиниках принцип сдачи анализов ничем не отличается, только при этом услуга оказывается за деньги. Стоимость — от 400 до 3 400 рублей, в зависимости от сложности и вариантов проверки.

Ложноположительные результаты диагностики ВИЧ-инфекции, приводящие ко множеству печальных последствий

Как я и обещал, информирую о нехорошей тенденции связанной с гипердиагностикой ВИЧ-инфекции, приводящие к судебным разбирательств — от уголовных, в случае суицидов, до гражданских с моральным вредом, в случае распада семей и прочих наступивших последствий.

Что же мы имеем на сегодняшний день… Лекарства созданы еще в 90-е, но они почему-то никому не интересны. всё больше интерес вызывает возможность «вваливать» в это «вялое» направление денег для получения какой-то «ужасающей» статистики и ещё большего раскошмаривания населения и опять же типа вваливать денег. Управление умами — чем не благая цель.

Немного позже я опубликую другие «недобрые» «благие» тенденции, а сейчас разберемся со СПИДом.

ВИЧ-инфекция — заболевание, развивающееся в результате заражения вирусом иммунодефицита человека, в настоящее время из смертельных заболеваний перешла в разряд медленно текущих, управляемых инфекций.

ВИЧ — экзогенный ретровирус, т.е. он способен размножаться в клетке с формированием инфекционной частицы и передаваться как между клетками, так и многоклеточными хозяевами. Доказанным является факт, что геном человека на 45 % состоит из ретроэлементов (ретровирусов, ретротранспозонов и их производных).

СПИД характеризуется развитием бактериальных, грибковых, вирусных, протозойных и паразитарных заболеваний, опухолевых процессов (чаще лимфом и саркомы Капоши).
Основные клинические проявления СПИДа — лихорадка, ночная потливость, быстрая утомляемость, потеря массы тела (до кахексии), диарея, генерализованная лимфаденопатия, гепатоспленомегалия, пневмоцистная пневмония, прогрессирующие неврологические нарушения, кандидоз внутренних органов, лимфомы, саркома Капоши, оппортунистические и вторичные инфекции.
Терминальная стадия

Нарастают кахексия, общая интоксикация, деменция, прогрессируют интеркуррентные заболевания. Заканчивается процесс летальным исходом.

При всей полиморфности клинической картины ВИЧ-инфекции характерна определенная часто встречающаяся патология или нозология:
 Лимфоаденопатия — 100 %
 Поражение кожи — до 90 %:
(бактериальные поражения: стафилококк, синегнойная инфекция, бациллярный ангиоматоз, микобактериоз; вирусные: herpessimplex, v. Zoster, паппилома человека, контагиозный моллюск; поражения грибами: кандидоз, дерматофития; паразиты кожи: чесотка, простейшие; неинфекционные поражения: ксероз, себорейный дерматит, саркома Капоши)
 Пневмоцистная пневмония — 50 %
 Поражение центральной нервной системы — 30 %
В настоящее время существует 4 группы методов лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции, направленных на выявление[11]:

Вируса в биологических субстратах (кровь, пунктаты лимфатических узлов и др.) инфицированных людей с помощью вирусологических методов (ВИЧ-культура)
Вирусных антигенов (конкурентный ИФА, реакция им- муннофлуоресценции и др.)
Антител к ВИЧ: ИФА, иммуноблотинг (вестерн-блотинг), радиоиммуннопреципитация, метод агглютинации с использованием различных носителей, метод иммуннофлуоресценции и др.;
Генетического материала ВИЧ: молекулярная гибридизация, полимеразная цепная реакция.

Наиболее широко используются методы, направленные на обнаружение антител к ВИЧ.

Серологическая диагностика осуществляется в специализированных лабораториях в два этапа: на первом этапе выявляют антитела против антигенов ВИЧ с помощью твердофазного иммунноферментного анализа (ИФА).

На втором этапе в качестве подтверждающего теста используют метод вестерн-блотинга/иммуноблотинга, который позволяет определить антитела к отдельным вирусным белкам.

Иммуноблотинг. Вариант ИФА, повышающий чувствительность метода при изучении гетерогенной смеси антигенов. Смесь антигенов подвергают дискэлектрофорезу в полиакриламидном геле в присутствии додецилсульфата натрия.

Полученные таким образом индивидуальные полосы антигенов переносят на нитроцеллюлозные полоски с помощью специального аппарата для переноса. В дальнейшем ход реакции сводится к гетерогенному не конкретному ИФА.

Нитроцеллюлозные полоски с перенесенными на них антигенами обрабатывают испытуемой сывороткой. Имеющиеся в ней антитела связываются с индивидуальными антигенами, представленными в виде отдельных полос.

Связавшиеся антитела проявляют при обработке конъюгатом фермента с антителами к иммуноглобулинам человека. На последнем этапе определяют активность фермента. Таким образом, можно определить против каких антигенов смеси направлены антитела сыворотки больного.

На основе реакции иммуноблотинга созданы диагностические наборы для определения в сыворотке больного антител к вирусу гепатита С и ВИЧ-1-2.

Положительный результат с иммуноблота, по которым ставят «окончательный диагноз» выглядит так:
Western Blot Interpretation
Result: Positive by Western Blot Technique

Interpretation: Indicates possible infection by virus. Viremia may be present. Positive results are not diagnostic of AIDS. Biologic false politives still possible in some select cases. Western Blot technique is recommended as a confirmatory test for blood donor units. Follow up testing may be advised if clinical.

Перевод: Результат: положительный по методике Western Blot

Толкование: указывает на возможное заражение вирусом. Виремия может присутствовать. Положительные результаты не являются диагностикой СПИДа. Биологические ложноположительные результаты в некоторых случаях. Метод Western Blot рекомендуется в качестве подтверждающего теста для донорских единиц крови. Последующее тестирование может быть рекомендовано, если клиническое.

Ассоциация американских врачей и хирургов
9 марта 2010
Контактное лицо: Джейн Ориент, MD (800) 323-3110, [email protected]

или Генри Бауэра, к.т.н., (540) 951-2107, [email protected]

Для немедленного опубликования:

Ученый объясняет, что скрининговые тесты на вич инфекцию дают ложноположительный результат. Весна 2010 выпуск «Журнала американских врачей и хирургов, Henry H. Bauer, к.т.н.

, пишет, что» тесты на ВИЧ не являются тестами на ВИЧ «. Положительный результат не означает, что лицо имеет или получит СПИД. Это даже не означает, что у него ВИЧ.

Скорее, это тест на антитела к ВИЧ-либо или что-то перекрестно реагирует с ней.

Антитела могут появляется при наличии ряда заболеваний, включая рассеянный склероз, герпес, туберкулез, малярия и апластической анемии, также после иммунизации столбняка или гриппа, и даже может быть вызвана самой беременности.

«Все скрининговые тесты, в том числе и тесты на ВИЧ, «грешат» ложноположительными результатами,» говорит Джейн М. Ориент, доктор медицины, исполнительный директор Ассоциации американских врачей и хирургов (AAPS). «Если провести скрининг населения с очень низкой вероятностью заболевания, будет очень мало положительных тестов.

Даже самые «надежные» тесты дают больше ложноположительный результат, чем истиноположительный, ». Если только у 1-ого из 1000 протестированных лиц будет вич+, то только один из шести положительных результатов является истинно положительным, даже если считать, что тесты на ВИЧ на самом деле такие надежные, как это утверждается.

Статья доктора Бауэра о тестировании на ВИЧ можно получить полностью здесь: http://hiv-dissidents.taba.ru/blog/26497_ChUDO_TESTY…

Что же получается на практике? Скрининг донорской крови слишком часто дает положительные результаты.

Потому для получения «более достоверных результатов» используется разведение в 400 раз!!! Таким образом уменьшают вероятность встречи с «нужным» набором для реакции иммуноблота.

Ну и донор есть донор это почти святое, а если вы обратились самостоятельно, бесплатно провериться на ВИЧ инфекцию, шансы ее получить значительно возрастают.

Иммунный блоттинг в диагностике ВИЧ

Иммунный блоттинг (иммуноблот, Western Blot, вестерн-блот) — сочетает в себе иммуноферментный анализ (ИФА) с предварительным электрофоретическим переносом на нитроцеллюлозную полоску (стрип) антигенов вируса.

В этом красивом ученом названии «blot» переводится скорее всего как «клякса», а «western» — как « западная» отражает направление распространения этой «кляксы» по бумаге слева направо, то есть на географической карте это соответствует направлению с запада на восток.».

Суть метода «иммунный блот» заключается в том, что иммуноферментную реакцию проводят не со смесью антигенов, а с антигенами ВИЧ, предварительно распределенными методом иммунофореза по фракциям, располагающимся согласно молекулярному весу по поверхности нитроцеллюлозной мембраны.

В результате основные белки ВИЧ, носители антигенных детерминант, распределяются по поверхности в виде отдельных полос, которые и проявляются при проведении иммуноферментной реакции.

Иммуноблот включает в себя несколько стадий:

Подготовка стрипа.

Предварительно очищенный и разрушенный до составных компонентов вирус иммунодефицита (ВИЧ) подвергается электрофорезу, при этом входящие в состав ВИЧ антигены разделяются по молекулярному весу.

Затем методом блоттинга (аналог выдавливания на «промокашку» избытка чернил) антигены переносят на полоску нитроцеллюлозы, которая отныне содержит невидимый пока глазом спектр антигенных полос, характерный для ВИЧ.

Исследование пробы. На нитроцеллюлозную полоску наносится исследуемый материал (сыворотка, плазма крови пациента и т.п.), и если в пробе есть специфические антитела, то они связываются со строго соответствующими им (комплиментарными) антигенными полосами. В результате последующих манипуляций результат этого взаимодействия визуализируется — делается видимым.

Трактовка результата. Наличие полос в на определённых участках нитроцеллюлозной пластины подтверждает присутствие в исследованной сыворотке антител к строго определённым антигенам ВИЧ.

Полоска А — Положительный контроль
Полоска В — Слабоположительный контроль
Полоска С — Отрицательный контроль
Полоска D — Положительный образец (обнаружено присутствие антител к ВИЧ-1)

В настоящее время иммунный блоттинг (иммуноблот) является основным методом для подтверждения наличия вирусспецифических антител в исследуемой сыворотке. В некоторых случаях ВИЧ-инфекции, до развития сероконверсии, специфические антитела более эффективно выявляются методом иммунного блоттинга, чем ИФА.

При исследовании методом иммунного блоттинга обнаружено, что чаще всего в сыворотках больных СПИДом выявляются антитела к gp 41, причем обнаружение р24 у лиц, обследуемых с профилактической целью, требует дополнительных исследований на наличие у них ВИЧ-инфекции.

Тест-системы для иммунного блоттинга на основе рекомбинантных белков, полученных путем генной инженерии, оказались более специфичными, чем обычные системы на основе очищенного вирусного лизата.

При использовании рекомбинантного антигена формируется не диффузная, а четко выраженная узкая полоска антигена, легко доступная для учета и оценки.

Сыворотки лиц, инфицированных ВИЧ-1, обнаруживают антитела к следующим основным белкам и гликопротеидам — структурным белкам оболочки (env) — gp160, gp120, gp41; ядра (gag) — p17, p24, p55, а также ферментов вируса (pol) — p31, p51, p66. Для ВИЧ-2 типичны антитела к env — gp140, gp105, gp36; gag — p16, p25, p56; pol — p68.

Среди лабораторных методов, необходимых для установления специфичности реакции, наибольшее признание имеет обнаружение антител к белкам оболочки ВИЧ-1- gp41, gp120, gp160, и ВИЧ-2 — gp36, gp105, gp140.

ВОЗ считает положительными сыворотки, в которых методом иммунного блотинга обнаруживаются антитела к каким-либо двум гликопротеидам ВИЧ.

Согласно этим рекомендациям, при наличии реакции только с одним из белков оболочки (гп 160, гп 120, гп 41) в сочетании или без реакции с другими белками, результат считается сомнительным и рекомендуется повторное исследование, используя набор другой серии или другой фирмы. Если и после этого результат остается сомнительным, рекомендуется наблюдение в течение 6 месяцев (исследования через 3 месяца).

Наличие положительной реакции с антигеном p24 может указывать на период сероконверсии, так как антитела именно к этому белку иногда появляются первыми.

В этом случае рекомендуется, в зависимости от клинических и эпидемиологических данных, повторить исследование с образцом сыворотки, взятым как минимум через 2 недели, и это является как раз тем случаем, когда при ВИЧ-инфекции необходимо исследование парных сывороток.

Положительные реакции с белками gag и pol без наличия реакции с белками env могут отражать стадию ранней сероконверсии, а также может указывать на ВИЧ-2 инфекцию или на неспецифическую реакцию. Лиц с такими результатами после тестирования на ВИЧ-2 повторно исследуют через 3 месяца (в течение 6 месяцев).

Типичные ошибки при диагностике ВИЧ-инфекции

22 декабря 2006 15:33

При диагностике ВИЧ-инфекции часто встречается типичная ошибка, когда диагноз ВИЧ устанавливается на основании какого-нибудь лабораторного теста, к которому у врача по той или иной причине возникает чересчур сильное доверие.

Диагностика ВИЧ-инфекции включает в себя два этапа: установление собственно факта зараженности ВИЧ-инфекцией и определение стадии заболевания. За определением стадии неразрывно следует и выяснение характера течения заболевания, а затем и формирование прогноза у данного больного, а также выбор тактики лечения.

Как известно, диагностика любого инфекционного заболевания основана на сопоставлении эпидемиологических, клинических и лабораторных данных, и преувеличение значения одной из групп этих данных может привести к диагностическим ошибкам.

С самого начала следует предупредить читателя, что при диагностике ВИЧ-инфекции часто встречается типичная ошибка, когда диагноз устанавливается на основании какого-нибудь лабораторного теста, к которому у врача по той или иной причине возникает чересчур сильное доверие. Некоторые работники лабораторий даже сами берут на себя смелость устанавливать диагноз ВИЧ-инфекции, никогда не видя больного.

Иногда клиницисты также безоговорочно доверяют результатам лабораторных исследований, которые могут служить только как отдельные свидетели в деле вынесения окончательного приговора пациенту.

За те тринадцать лет, что мы наблюдаем ВИЧ-инфекцию в России, нам пришлось видеть десятки, если не сотни, случаев ошибок, связанных с фанатичным доверием некоторых врачей к лабораторному анализу.

Мы можем не останавливаться на сплошь и рядом встречающихся «обыкновенных» ошибках, которые возникают при перепутывании сывороток, неправильном заполнении документации и т. п. Клиницист просто обязан знать «диагностическую ценность» того или иного метода.

Нам известен случай, когда в Санкт-Петербурге в результате неумелого использования какого-то «нового» метода, один «ученый» выдал диагноз «ВИЧ-инфекция» совершенного здоровому и неинфицированному человеку (которого он, кстати, никогда не видел), в результате чего последний покончил с собой.

Другой, не менее «выдающийся ученый», несколько лет водил за нос руководство одной бывшей советской республики, доказывая, что население этой страны «поражено эпидемией СПИДа», поскольку разработанный им « сверхчувствительный» метод исследования «выявляет ВИЧ-инфекцию у зараженных намного раньше, чем все другие известные методики».

В обоих случаях речь, конечно, шла о ложных реакциях, которые давали их «новейшие методы».

Как мы уже отмечали, новые методы диагностики должны подтверждаться старыми, а не наоборот. Поэтому нашей общей рекомендацией для клиницистов и эпидемиологов является скептическое отношение ко всем «новейшим» методикам, до тех пор, пока они не «устареют», то есть пока не станут известны все их достоинства и недостатки.

В текущей ситуации это прямо касается диагностики на основе полимеразной цепной реакции — ПЦР (PCR) и прочих «геннодиагностических методов», с помощью которых отдельные исследователи уже «обнаружили СПИД у египетских мумий» и «уже начали обнаруживать его у крыс».

Последние достижения лишь показывает, что для полной адаптации данных методик для нужд медицины понадобится еще несколько лет.

В силу сложившейся в России традиции миллионы людей обследуются на антитела к ВИЧ без определенных показаний, и в большинстве случаев врач сначала получает данные исследования (положительная реакция на антитела к ВИЧ), а лишь потом видит самого больного и может его опросить.

При таком положении вещей быстро забывается, что лабораторное исследование служит лишь подтверждением клинического. В тех же случаях, когда врач уже знает, что у осматриваемого больного выявлены антитела к ВИЧ, он легко может ошибиться, пойдя на поводу у бумажки с соответствующей записью.

Практический интерес представляют случаи, когда пациент находится в стадии инкубации или стадии первичных проявлений ВИЧ и количество антител в его крови еще слишком мало для выявления. Тем не менее, при достаточном опыте инфекционисты довольно быстро распознают эти случаи.

К числу наиболее изученных и распространенных относится метод обнаружения антител к ВИЧ.

Так как ВИЧ-инфекция в большинстве случаев длится пожизненно, то для диагностики достаточно самого факта обнаружения антител.

При ВИЧ-инфекции, в отличие от других инфекций, в большинстве случаев нет необходимости использовать парные, то есть взятые через определенный временной промежуток, сыворотки.

Обнаружение антител, в принципе, может выявить более 99% инфицированных ВИЧ лиц.

Некоторые сложности связаны с тем, что антитела к ВИЧ отсутствуют в первые недели после заражения, а также их количество может заметно снижаться в терминальном периоде заболевания.

Имеются сведения об отдельных, но достаточно редких случаях ВИЧ-инфекции, когда антитела длительно не обнаруживаются или исчезают на сравнительно длительный срок.

Все известные тест-системы имеют некоторые ограничения по своей возможности выявлять все сыворотки, содержащие антитела к ВИЧ, ( по чувствительности ) уже хотя бы потому, что количество этих антител может быть очень небольшим, особенно в начальный и финальный периоды болезни. Однако в модельных опытах с заранее известными заведомо позитивными сыворотками («диагностическая панель сывороток») чувствительность некоторых тест-систем может достигать 100% — то есть они выявляют все заведомо «положительные» сыворотки, использованные в данном эксперименте. При этом, разумеется, не следует забывать, что лица, проводящие испытания, могут случайно или сознательно подбирать сыворотки с теми или иными особенностями, что влияет на результат испытания.

В то же время и ложноположительные реакции присущи практически всем тест-системам. Это связано с тем, что в исследуемых материалах могут присутствовать антитела к антигенам, сходным с антигенами ВИЧ, или примесям к антигену.

Так, при классической методике получения антигена ВИЧ из лизата клеточных культур вируса в конечном продукте обнаруживаются фрагменты лимфоцитов, антитела к которым могут давать ложные реакции (5) и т.п.

Отмечено, что по мере повышения чувствительности теста, отмечается тенденция к увеличению числа ложноположительных реакций.

На практике к этому добавляются также ложноотрицательные и ложноположительные результаты, возникающие из-за ошибок персонала, ухудшения качества систем из-за транспортировки и хранения в неправильных условиях, из-за снижения качества тест-систем вследствие длительного хранения.

Поэтому, наряду с со специфичностью и чувствительностью, определенными в лабораторных условиях иногда определяют эти параметры в «полевых» условиях, то есть такими, какими они достаются практическому здравоохранению. Как правило «полевые» характеристики, вследствие вышеперечисленных причин ниже лабораторных.

На результаты использования тест-систем могут оказывать влияние даже такие факторы, как качество используемой для промывания посуды воды и т.п.

Чаще всего антитела к ВИЧ обнаруживают иммуноферментными методами.

Принципиальных различий в многочисленных коммерческих тест-системах для твердофазного иммуноферментного анализа нет, хотя по чувствительности и специфичности они могут существенным образом отличаться.

Довольно часто наблюдается, что одни и те же сыворотки дают различные результаты при использовании различных тест-систем. Отсюда, безусловно, признано, что «положительные» результаты обследования в одной тест-системе нельзя считать безусловно «истинно-положительным» результатом.

В связи с этим предложен и используется ряд методов для проверки специфичности результатов обнаружения антител. Среди этих методов наиболее часто применяют реакцию «иммунный блотинг» или «иммуноблот» в модификации Western Blot. (В этом красивом ученом названии «blot» переводится скорее всего как «клякса», а «western» — как « западная» отражает направление распространения этой «кляксы» по бумаге слева направо, то есть на географической карте это соответствует направлению с запада на восток.»). Суть метода «иммунный блот» заключается в том, что иммуноферментную реакцию проводят не со смесью антигенов, а с антигенами ВИЧ, предварительно распределенными методом иммунофореза по фракциям, располагающимся согласно молекулярному весу по поверхности нитроцеллюлозной мембраны. В результате основные белки ВИЧ, носители антигенных детерминант, распределяются по поверхности в виде отдельных полос, которые и проявляются при проведении иммуноферментной реакции.

Методом, теоретически упрощающим диагностику, является методика обнаружения антител к ВИЧ в слюне, которая в настоящее время приближается по чувствительности к обнаружению антител в крови, но пока значительно уступает по специфичности, то есть, дает большее количество ложноположительных результатов.
Кроме иммуноферментных, с успехом развиваются и другие методы обнаружения антител в крови: агглютинационный, иммунофлюоресцентный, радио-иммунопреципитационный и другие.
Материал взят с сайта «Мужской журнал MENsTiME»

23 ноября 2006 | 16:11

УЗИ. Что обнаружит УЗИ?

Ультразвуковое исследование — один из современных, высокоинформативных и широко доступных методов исследования в акушерстве и гинекологии. Метод основан на принципе эхолокации.

Специальный датчик излучает ультразвуковые колебания, которые, отражаясь от исследуемых органов, принимаются тем же датчиком.

С помощью компьютерной обработки на экране аппарата получается изображение определенного сечения изучаемого органа.

09 октября 2006 | 17:10

3D/4D УЗИ – «четвертое» измерение!

Практически каждая будущая мама хочет увидеть своего малыша ещё до родов. Ведь так важно знать, как он там, как выглядит, что делает… Отчасти именно этого она ждет, впервые отправляясь на ультразвуковое исследование.

Жаль только, что порой после УЗИ приходит разочарование: только богатая фантазия и комментарии врача позволяют признать вот в этом «белом комочке» будущего малыша, а в этих «двух белых пятнышках» – его крошечные ножки.