Антинуклеарный фактор (АНФ) и антитела: понятие, анализ — назначение и интерпретация, причины повышения, диагностическая тактика

В клеточном ядре соединительной ткани человеческого организма содержится около ста антигенов, это — гистоны, нуклеиновые кислоты, белки ядерной мембраны, рибонуклео-протеины, компоненты сплайсосомы и многие другие. При различных системных патологиях организм вырабатывает гетерогенную группу аутоиммунных антител, которые направлены против различных компонентов собственных ядер. Они называются антиядерными (или антинуклеарными) антителами.

Появление антиядерных антител в плазме крови связывают с распадом клеток при системных аутоиммунных патологических процессах, в результате которых происходит повышение реактивной чувствительности соединительной ткани к нуклеарным (или ядерным) антигенам.

Скрининг антинуклеарного фактора необходим при диагностировании системных заболеваний: билиарного цирроза, системной красной волчанки, склеродермии. Исследование используется также в диагностике эндокринных, инфекционных и онкологических патологий.

Показания для назначения анализа

Анализ на антиядерные тела рекомендуют опытные специалисты-ревматологи, нефрологи, терапевты, педиатры при наличии у пациента клинических признаков аутоиммунных процессов:

• повышение температуры тела в течение длительного времени без проявления других клинических симптомов воспаления;
• боли в суставах;
• высыпания на коже;
• слабость и повышенная утомляемость;
• почечная недостаточность;
• увеличение печени и селезенки;
• воспаление легких;
• эпилепсия.

Анализ также проводят для мониторинга лечения системной красной волчанки и для оценки состояния пациента.

Методика проведения анализа

Для исследования используют кровь из вены, отбор проводится в утренние часы в манипуляционном кабинете лечебного учреждения.

Сложной подготовки к анализу не нужно, пациенту желательно:

1. Исключить моральные и физические перегрузки.
2. Ужинать накануне не позже 21 часа.
3. Утром не завтракать и не курить.

Медицинский персонал лаборатории должен выяснить — не принимает ли пациент медикаменты, оказывающие влияние на результат анализа, такие как: карбамазепин, нитрофурантоин, нифедипин. В случае положительного ответа, необходимо поставить в известность врача-лаборанта — эти препараты способны вызвать появление лекарственной волчанки.

Исследование проводят с использованием качественного иммуноферментного анализа, который является самой современной методикой скрининга антинуклеарного фактора. В ходе теста антиядерные антитела обнаруживают с помощью конкретного типа ядерных антигенов, которые зафиксированы на твердых носителях.

Интерпретация результатов

Нормальным показателем считается результат: «Антинуклеарный фактор — отрицательный». 

Причинами положительного результата является наличие:

При наличии сомнительного результата («серой зоны») пациенту рекомендуют пройти повторный скрининг антиядерного фактора через 14 дней.

Особенности скрининга «Антинуклеарные антитела» (ANA)

Антитела, атакующие нормальные протеины клеточного ядра, называют антинуклеарными. Чрезмерное их производство встречается при таких патологических состояниях, как:

• дерматомиозит – тяжелое прогрессирующее соединительнотканное заболевание, которое сопровождается поражением кожных покровов и внутренних органов, нарушением микроциркуляторного русла и двигательной функции мускулатуры;
• склеродермия – прогрессивный системный склероз, который протекает с поражением сосудистой системы, кожи, опорно-двигательного аппарата и внутренних органов;
• аутоиммунный гепатит – хроническое воспаление тканей печени, протекающее с поражением перипортальной области;
• ревматоидный артрит – тяжелое, трудно поддающееся лечению повреждение суставов и системное поражение внутренних органов;
• синдром Шегрена – поражение экзокринных желез (особенно слезных и слюнных).

Этиогенез аутоиммунных патологий отличается многогранностью – это является причиной его недостаточной изученности. Именно поэтому лабораторное исследование крови, позволяющее обнаружить наличие ANA, имеет важное значение в своевременном выявлении аутоиммунных процессов.

Важно знать, что у небольшой части практически здоровых людей (около 3-х %) выявляется высокая концентрация антиядерных антител при отсутствии какого-либо заболевания. С возрастом появление в циркулирующей крови данного типа иммуноглобулинов увеличивается и у лиц, перешагнувших 60-ти летний рубеж, достигает почти 35%.

Наиболее часто ANA выявляются у пациентов, страдающих системной красной волчанкой (до 80% случаев). Данная патология относится к ревматологическим, ее клинические признаки появляются постепенно – с возникновения:

• общего недомогания;
• высокой температуры тела;
• болезненных ощущений в суставах;
• гиперемии на кожных покровах лица по типу бабочки.

Иногда схожая симптоматика наблюдается у лиц, которые принимают Хлорпромазин, Карбамазепин, Гидралазин – после их отмены характерные признаки исчезают. Данное явление носит название синдрома лекарственной волчанки.

Диагностирование и лечение системной красной волчанки – поле деятельности врача-ревматолога. Нетипичное течение патологии и разнообразие ее симптоматики затрудняет диагностику, именно поэтому определение антиядерных антител считается специфическим маркером, позволяющим подтвердить либо опровергнуть предположение о наличии СКВ. 

К некорректным итоговым данным теста может приводить уремия (тяжелое последствие прогрессирующей почечной недостаточности, возникновение которого вызывает интоксикация организма азотистыми, липопротеиновыми и водородными метаболитами, проявляется астеническим состоянием, бледностью, зудом и пожелтением кожных покровов, диспепсией, петехиальными высыпаниями, артериальной гипертензией, запахом аммиака из ротовой полости, нарушением дыхания) и прием некоторых медикаментозных средств.

Получение отрицательного результата при наличии у пациента признаков аутоиммунного процесса не исключает отсутствие заболевания.

Положительный результат у лиц без присутствия характерных симптомов аутоиммунной патологии следует интерпретировать, принимая во внимание данные личного и семейного анамнеза, дополнительного лабораторного и инструментального обследования (риск СКВ в таком случае увеличивается на 40%).

• Где сдать?
• Анализы на дому
• Результаты анализов
• Уникальные анализы

Сдать анализ на антинуклеарный фактор (АНФ, HEp-2, титры) — цены в Москве в ИНВИТРО

Метод определения Непрямая иммунофлюоресценция на клетках перевиваемой клеточной линии НЕр-2 с определением основных типов свечения ядра.

Исследуемый материал Сыворотка крови

Доступен выезд на дом

Онлайн-регистрация

Синонимы: Анализ кров на антинуклеарные антитела; Антиядерные антитела; АНА нРИФ; Antinuclear Antibodies; ANA indirect immunofluorescence assay IFA, HEp-2 Substrate; ANA-HEp2; Fluorescent AntiNuclear Antibody detection; FANA.

Термин «антинуклеарный фактор» — традиционное обозначение результатов исследования антинуклеарных антител (АНА), полученных при использовании метода непрямой реакции иммунофлуоресценции на клеточных и тканевых субстратах (в современной модификации – преимущественно на препаратах клеток HEp-2).

Антинуклеарные антитела – семейство аутоантител, направленных против внутриклеточных антигенов собственных клеток организма.

Исторически антитела этой группы, направленные против ядер клеток, были впервые выявлены в сыворотке больных системной красной волчанкой (СКВ), поначалу из их точных мишеней были известны только двухспиральная ДНК и гистоны, поэтому они получили общее название «антинуклеарные антитела».

«Золотым стандартом» исследования антинуклеарных антител и рекомендуемым скрининговым тестом при подозрении на системные аутоиммунные ревматические заболевания является метод непрямой иммунофлуоресценции на препаратах HEp-2-клеток с указанием типа свечения и титров выявленных антител.

Ядро и цитоплазма клеток НЕр-2 содержат все антигены, характерные для человеческой клетки, что позволяет выявлять в одном тесте основные виды антинуклеарных антител. Часть их имеет мишенью ДНК или связанные нуклеосомные белки, другие нацелены на РНК и рибонуклеопротеины, антигены ядерной оболочки или аппарата митотического веретена.

Многие из рибонуклеопротеиновых мишеней могут находиться как в ядре клетки, так и в цитоплазме, а некоторые исключительно в цитоплазме, т. е. являются, по сути, не нуклеарными, а цитоплазматическими антигенами.

Однако все эти антитела причисляют к антинуклеарным соответственно обозначению метода их исследования, при этом выявляемый данным методом спектр антител шире и объединяет антитела не только к ядерным, но и другим внутриклеточным аутоантигенам.

АНА — ценный лабораторный маркер различных аутоиммунных заболеваний. Хотя бы однократное обнаружение антинуклеарных антител методом непрямой флуоресценции на клетках HEp-2 (или эквивалентным тестом) у пациента является критерием включения при диагностике СКВ  системной красной волчанки, согласно EULAR/ACR 2019.

Специфические антинуклеарные антитела включены в классификационные критерии ряда других аутоиммунных заболеваний.

При положительном результате АНФ вероятная клиническая значимость выявленного типа свечения учитывается в комплексе с клинической картиной, что позволяет планировать дальнейшее тестирование для определения специфичности антинуклеарных антител.

При системной красной волчанке и других системных ревматических заболеваниях иммунный ответ направлен против нуклеопротеиновых антигенов, т. е. комплексов нуклеиновых кислот и белков.

Такие эндогенные нуклеопротеиновые аутоантигены могут образовываться в ходе процесса апоптоза эпителиальных клеток (каскада генетически запрограммированных реакций, приводящих к удалению поврежденной или дефектной клетки) и напоминают чужеродные вирусные частицы.

Ускорение процессов апоптоза под действием ультрафиолетового облучения, вирусных инфекций или лекарственных препаратов, происходящее одновременно с нарушенным или замедленным удалением продуктов апоптоза, запускает аутоиммунные ответы при СКВ.

Нуклеопротеиновые антигены конденсируются в апоптотических тельцах, которые становятся мишенью для аутоантител. В настоящее время описано около двухсот разновидностей антител к нуклеопротеинам и рибонуклеиновым кислотам, которые получили название антинуклеарные антитела.

При аутоиммунных заболеваниях аутоантитела к ядерным антигенам не обладают прямым цитотоксическим действием на клетки человека, однако иммунные комплексы способны запускать иммунологическое воспаление, особенно в сосудах микроциркуляторного русла, в том числе в почках, коже, центральной нервной системе, синовиальной оболочке суставов, плевре.

В силу многообразия антигенов антинуклеарных антител не все они могут быть очищены или синтезированы для использования в автоматизированных иммуноферментных тестах по выявлению антинуклеарных антител. В свою очередь легкорастворимые компоненты ядра клетки могут утрачиваться из ядер клеток при фиксации препарата для проведения исследований антинуклеарного фактора методом непрямой иммунофлуоресценции. Поэтому использование ИФА-методов (см. тесты № 825, № 125) в комплексе с выявлением антинуклеарного фактора на клетках линии НЕр-2 методом непрямой иммунофлуоресценции позволяет избежать ложноотрицательных результатов тестирования при скрининге системных ревматических заболеваниях.

Метод непрямой иммунофлуоресценции на клеточной линии НЕр-2 рекомендован в качестве «золотого стандарта» выявления антинуклеарных антител ведущими экспертами, включая европейские (EASI Group, 2010) и американские группы экспертов (ACR ANA Task Force, 2008).

Позитивность по антинуклеарному фактору на клеточной линии НЕр-2 отмечается при системной красной волчанке, системных ревматических и многих других аутоиммунных заболеваниях, что делает его универсальным скрининговым тестом в обследовании больных с подозрением на системную аутоиммунную патологию.

Положительный результат АНФ отмечается более чем у 90% больных с диффузными болезнями соединительной ткани, такими как СКВ и кожные формы этого заболевания, склеродермия и ее разновидности, смешанное заболевание соединительной ткани, синдром Шёгрена.

Выявление антинуклеарного фактора имеет большое значение в диагностике ювенильного ревматоидного артрита.

Данные аутоантитела могут быть обнаружены при многих других аутоиммунных (тиреоидит, диабет, аутоиммунные заболевания печени), инфекционных (вирусный гепатит), воспалительных и онкологических заболеваниях. Встречаемость антинуклеарного фактора достигает 1-3% у клинически здоровых людей и несколько возрастает у лиц старше 65 лет.

Антинуклеарный фактор на HEp-2 клетках, IgG

• Метод исследования с использованием человеческих эпителиальных клеток HEp-2, который позволяет обнаружить антинуклеарные антитела – один из маркеров системных заболеваний соединительной ткани.
• Синонимы русские
• АНФ, антиядерные антитела, антинуклеарные антитела (АНА).
• Синонимы английские
• Antinuclear Antibodies (ANA), Hep-2 Substrate, ANA-Hep2, Fluorescent AntiNuclear Antibody detection (FANA).
• Метод исследования
• Непрямая реакция иммунофлюоресценции.
• Какой биоматериал можно использовать для исследования?
• Венозную кровь.
• Как правильно подготовиться к исследованию?
• Не курить в течение 30 минут до исследования.
• Общая информация об исследовании
• Определение антинуклеарного фактора (АНФ) является «золотым стандартом» выявления антинуклеарных антител (АНА) и диагностики аутоиммунных заболеваний.

Патогенез системных заболеваний соединительной ткани (СЗСТ) тесно связан с нарушениями в иммунной системе и повышенной выработкой антител к структурам собственных клеток.

Аутоантитела к компонентам ядра клеток – антинуклеарные антитела – взаимодействуют с нуклеиновыми кислотами и белками ядра, антигенами цитоплазмы, что проявляется воспалительными изменениями в тканях и органах, болями в суставах и мышцах, выраженным утомлением, потерей веса, кожными изменениями.

АНА обнаруживаются при многих аутоиммунных заболеваниях, но наиболее характерны для системной красной волчанки (СКВ). АНА встречаются более чем у 90  % больных системными заболеваниями соединительной ткани, в настоящее время описано около 200 разновидностей, которые объединены единым названием – антинуклеарный фактор.

При определении АНФ методом непрямой флюоресценции чаще используется перевиваемая линия эпителиальных клеток аденокарциномы гортани человека НЕр-2. Клетки НЕр-2 являются очень удобным субстратом для лабораторного исследования, так как обладают крупными ядрами и на стеклах растут в один слой. АНА выявляются при связывании с внутриклеточными антигенами клеток НЕр-2.

При исследовании эпителиальные клетки НЕр-2 выращивают на стеклах, фиксируют и инкубируют с разведенной сывороткой крови пациента. После удаления избытка сыворотки клетки инкубируют с меченными флюоресцеином антителами, затем снова промывают и исследуют с помощью флюоресцентного микроскопа.

При этом определяется титр антител и тип свечения. Диагностически значимым считается титр более 1:160. При обострении ревматических заболеваний он превышает 1:640, а в период ремиссии снижается до 1:160-1:320. Чем больше антител, тем выше титр.

По типу свечения можно установить мишени антинуклеарных антител, что имеет важное клиническое значение и определяет тактику дальнейшего обследования пациента. Основными являются периферический, гранулярный (мелко-/крупно-), ядрышковый, центромерный и цитоплазматический типы окрашивания ядра.

Каждому типу свечения присущи очень характерные признаки, которые позволяют отличить один вариант от другого.

Гомогенное (диффузное) окрашивание связано с наличием антител к двуспиральной ДНК, гистонам и характерно для СКВ и лекарственной волчанки.

Периферическое свечение обусловлено периферическим распределением хроматина в ядре, связано с антителами к ДНК и специфично для СКВ. Данный тип свечения важно дифференцировать от окрашивания ядерной мембраны, которое происходит при аутоиммунных заболеваниях печени.

Гранулярное (крапчатое, сетчатое) окрашивание встречается наиболее часто и является наименее специфичным, выявляется при многих аутоиммунных заболеваниях. Аутоантигенами в данном случае выступают нуклеопротеиновые комплексы в ядре (Sm, U1-RNP, SS-A, SS-B антигены и PCNA).

Очень высокие титры АНФ с крупногранулярным типом свечения часто указывают на смешанное заболевание соединительной ткани.

Нуклеарное (ядрышковое) окрашивание обусловлено антителообразованием к компонентам ядрышка (PHК-полимераза-1, NOR, U3RNP, PM/Scl), выявляется при склеродермии, болезни Шегрена.

АНА иногда повышаются при эндокринных заболеваниях (сахарном диабете 1-го типа, тиреоидите, тиреотоксикозе, полиэндокринном синдроме), кожных заболеваниях (псориазе, пузырчатке), при беременности, после трансплантации органов и тканей, у больных на гемодиализе.

Центромерное свечение появляется при наличии антител к центромерам хромосом и характерно для формы склеродермии – CREST-синдрома.

Цитоплазматический тип свечения связан с антителами к тРНК-синтетазе, в частности к Jo-1, что характерно для дерматомиозита и полимиозита. Данный тип окрашивания также определяется при наличии антител к другим компонентам цитоплазмы при аутоиммунном гепатите, первичном билиарном циррозе.

1. Одновременное выявление различных типов свечения указывает на присутствие разных видов антител.
2. У здоровых людей может быть обнаружено мелкогранулярное свечение при низких, умеренных или высоких титрах АНА, но в норме крупнозернистые или гомогенные типы свечения не должны определяться.
3. В зависимости от результатов оценки типа свечения разрабатывается дальнейшая тактика лечения пациента и назначаются дополнительные исследования, уточняющие спектр АНА.
4. Для чего используется исследование?

• Для диагностики системных заболеваний соединительной ткани.
• Для дифференциальной диагностики ревматических болезней.
• Чтобы оценить эффективность терапии аутоиммунных заболеваний.
• Для наблюдения за течением системных заболеваний соединительной ткани.

Когда назначается исследование?

• При симптомах аутоиммунного заболевания (длительное повышение температуры, боли в суставах, усталость, потеря массы тела, изменение кожных покровов).
• При выявлении изменений, характерных для системных заболеваний соединительной ткани (повышение СОЭ, уровня С-реактивного белка, циркулирующих иммунных комплексов).

• Что означают результаты?
• Референсные значения
• Результат: отрицательный.
• Титр: < 160.
• Причины повышения титра АНФ на HEp-2 клетках:

• cистемная красная волчанка (в 95  % случаев),
• дерматомиозит/полимиозит,
• системная склеродермия (в 60-90  % случаев),
• синдром Шегрена (в 40-70  % случаев)
• смешанное заболевание соединительной ткани (синдром Шарпа),
• синдром Рейно,
• дискоидная волчанка,
• лекарственная волчанка,
• ревматоидный артрит,
• некротизирующий васкулит,
• инфекционный мононуклеоз,
• лейкемия,
• злокачественные новообразования (преимущественно лимфома),
• тяжелая миастения,
• инфекционный эндокардит,
• хронический аутоиммунный гепатит,
• первичный билиарный цирроз печени,
• туберкулез,
• пневмокониоз,
• интерстициальный фиброз легких.

Типы свечения

Тип свечения	Для чего он характерен
Гомогенный	Для СКВ, лекарственной волчанки, системной склеродермии, хронического активного гепатита
Периферический	Для СКВ
Гранулярный	Для СКВ, синдрома Шегрена, смешанной болезни соединительной ткани, ревматоидного артрита
Ядрышковый	Для полимиозита/дерматомиозита, склеродермии, синдрома Шегрена, СКВ
Центромерный	Для CREST-синдрома (кальциноза кожи, синдрома Рейно, эзофагеальной дисфункции, склеродактилии, телеангиоэктазии)
Цитоплазматический	Для дерматомиозита/полимиозита, аутоиммунного заболевания печени, первичного билиарного цирроза

Что может влиять на результат?

• Ложноположительному результату способствует:

• • возраст старше 60-65 лет (в 10-37 % случаев);
  • применение лекарственных препаратов, которые могут привести к лекарственной волчанке (ацетазоламид, карбидопа, хлоротиазид, хлорпромазин, клофибрат, этосуксимид, соли золота, гризеофульвин, гидралазин, изониазид, соли лития, метилдопа, пероральные контрацептивы, пенициллин, фенилбутазон, фенитоин, примидон, прокаинамид, пропилурацил, хинидин, резерпин, стрептомицин, сульфаниламид, тетрациклин, тиазидные диуретики).

• Прием глюкокортикостероидов (преднизолон, дексаметазон, метипред) иногда приводит к ложноотрицательному результату.

Диагностика аутоиммунных заболеваний и синдромов

Антиядерные (антинуклеарные) антитела, ANA — (от англ. anti-nuclear antibodies; в России широко распространен менее удачный синоним — АНФ, антинуклеарный фактор, который не отражает давно установленную биологическую природу явления) — антитела против основных компонентов ядра клетки (нуклеопротеиды, белки хроматина и др.).

При системных аутоиммунных заболеваниях, а также в процессе развития многих других патологических состояний происходит сенсибилизация лимфоцитов к собственным белкам организма и вырабатываются аутоантитела, направленные против антигенов компонентов клеточных ядер и цитоплазмы.

Образующиеся иммунные комплексы аутоантиген-аутоантитело откладываются на базальных мембранах различных тканей и органов (кожа, почки, синовиальные, серозные оболочки, мозг и т. п.), а также снабжающих их кровью сосудов, активируя систему комплемента и вызывая воспаление и повреждение тканей.

При этом повышается лизосомальная активность, выделяются медиаторы воспаления. Цитотоксическое действие оказывают фиксируемый иммунными комплексами комплемент и сенсибилизированные лимфоциты. Поражение сосудов на уровне микроциркуляторного русла лежит в основе системного повреждения соединительной ткани и паренхиматозных органов.

Исследование на антиядерные антитела проводят, если возникает подозрение на аутоиммунное заболевание или присоединение аутоиммунного компонента, играющего существенную роль в патогенезе многих нозоформ.

Тест на ANA высокочувствителен (до 98%) при системной красной волчанке, однако  положительные результаты могут наблюдаться при других коллагенозах и иммунокомплексных заболеваниях, а также при прочих заболеваниях, протекающих с развитием аутоиммунного компонента.

Результаты теста, полученные в разных лабораториях, могут отличаться вследствие особенностей использующихся методов. Поэтому полноценный лабораторный ответ при исследовании антинуклеарных антител обязательно должен включать описание использованного метода.

Очень обширный перечень антигенов, объединенных в понятие «ядерные», требует также обязательного уточнения, антитела к каким из них могут быть выявлены используемым методом, а к каким — не могут.

Иммунофлюоресцентные методы, в которых в качестве субстрата используются животные клетки, позволяют, помимо антиядерных антител, выявлять и дифференцировать также антитела к некоторым компонентам цитоплазмы, что расширяет их возможности.

Показания к назначению анализа: диагностика и дифференциальная диагностика системных заболеваний соединительной ткани (особенно СКВ), аутоиммунного гепатита, вирусного гепатита с аутоиммунным компонентом (индуцированным вирусами или лечебными вмешательствами), первичного билиарного цирроза, рассеянного склероза; выявление аутоиммунного компонента при различных заболеваниях, в патогенезе которых может играть роль аутоагрессия. Материал для исследования: сыворотка крови.

• Для определения антинуклеарных антител используется методика непрямой иммунофлюоресценции с использованием в качестве субстрата клеток культивируемой линии Нер-2.
• Все вышеперечисленные особенности обязательно отражаются в лабораторном заключении, где, помимо указания типа свечения и соответствующего ему наиболее вероятного типа антител, даются также рекомендации по трактовке результатов в смысле возможной ассоциации с конкретными нозоформами или синдромами, а также необходимые дополнительные лабораторные исследования.
• Достоинством метода иммунофлюоресценции с использованием клеток злокачественных культивируемых линий является также возможность выявления антител к некоторым антигенам цитоплазматической локализации: митохондриям, актину, лизосомам и др.

Образец (исследуемая сыворотка крови) инкубируется с субстратом, если в сыворотке присутствуют аутоантитела к ядерным или цитоплазматическим антигенам, они связываются с соответствующими компонентами субстрата с образованием комплекса антиген-антитело, который выявляется конъюгатом — антителами против иммуноглобулинов человека, меченными ФИТЦ. В результате при изучении с помощью люминесцентного микроскопа выявляется специфическая флюоресценция соответствующих ядерных или цитоплазматических структур клеток. Использование в качестве субстрата клеток злокачественной культивируемой линии благодаря их особенностям (высокое ядерно-цитоплазматическое соотношение, крупные размеры, наличие большого количества митозов) позволяет оценить различные типы свечения, характерные для присутствия в образце крови широкого спектра антител к различным антигенам, имеющих различные клинические ассоциации.Следует иметь в виду, что часть из определяемых типов свечения является высокоспецифичной, четко ассоциирована с определенными заболеваниями и имеет вполне определенную диагностическую значимость, в особенности при выявлении в высоких титрах; однако некоторые антитела к различным антигенам могут давать сходные типы свечения, в таких случаях может требоваться дальнейшее обследование для уточнения конкретного антигена, к которому направлены аутоантитела. С другой стороны, определенный тип антител может встречаться при нескольких нозологических формах. Существуют также антитела (они встречаются редко), реагирующие исключительно с компонентами веретенного аппарата клеток; обычно они не связаны с аутоиммунными заболеваниями, и их обнаружение расценивается как ложнопозитивный, не имеющий клинических ассоциаций результат.Некоторые из выявляемых антиядерных и антицитоплазматических антител с характерными для них видами свечения и клиническими ассоциациями приведены ниже:

• ядерный гомогенный тип — антитела (АТ) к ДНК (двух- и односпиральной), антитела к ДНП (дезоксинуклеопротеид — комплекс ДНК с гистонами), антитела к гистонам, антитела к другим компонентам хроматина (протамины и т.д.); клинические ассоциации — СКВ (анти-ДНК, антитела к гистонам — в высоких титрах); лекарственная волчанка, ревматоидный артрит (антитела к гистонам);
• ядерный периферический тип — АТ к двухспиральной ДНК, гистонам; клинические ассоциации — СКВ, лекарственная волчанка);
• ядерно-мембранный ламиновый тип — АТ  к ламинам (фибриллярным белкам мембраны ядра); клинические ассоциации — СКВ, линейная склеродермия, ревматоидный артрит, сочетанный синдром гепатит/тромбопения/анемия;
• ядерно-мембранный кольцеобразный тип с крапчатым свечением цитоплазмы — антимитохондриальные антитела к компонентам митохондрий М2 (пируватдегидрогеназный комплекс), М3, М6; клинические ассоциации см. митохондриальный тип;
• ядерные каналы — АТ к белкам комплекса канальцев ядерной мембраны; клинические ассоциации — полимиозит;
• перихроминовый тип — АТ к перихромину; клинические ассоциации — СКВ;
• гетерогенный ядерный РНП (рибонуклеопротеин) — АТ к различным компонентам матрикса ядра; клинические ассоциации — смешанное заболевание соединительной ткани (СЗСТ);
• Sm/РНП  — АТ к ядерному РНП или Sm-комплексу; клинические ассоциации — СКВ, СЗСТ (антитела к Sm); синдром Шегрена, склеродермия, ревматоидный артрит, СКВ, дискоидная волчанка, вызванная прокаинамидом (антитела к РНП);
• центромерный тип — АТ к центромере (кинетохору); клинические ассоциации — синдром CREST (кальциноз, феномен Рейно, дисфункция пищевода, склеродактилия, телеангиэктазия), склеродермия, первичный билиарный цирроз
• ядерный крапчатый тип (NSP1) — АТ против слабо охарактеризованных белков, часто сочетающиеся с антителами к актину или митохондриям; клинические ассоциации — первичный билиарный цирроз (NSP1 + митохондриальный тип), хронический активный гепатит (NSP1 + актин);
• ядрышковый гомогенный тип — АТ к нуклеолину и другим компонентам ядрышек; клинические ассоциации — сочетанный синдром полимиозита/склеродермии, склеродермия в основном с поражением почек;  
• ядрышково-кластерный тип — АТ к фибриллярину (7-2-РНК), антитела к рибонуклеопротеину U3РНП; клинические ассоциации — склеродермия, обнаруживаемая в основном у молодых мужчин;
• ядрышково-крапчатый тип — АТ к Scl-70 (АТ к топоизомеразе 1); клинические ассоциации — склеродермия;
• митохондриальный (цитоплазматический) тип — АТ к М2 (пируватдегидрогеназный комплекс), М3, М6 компонентам митохондрий (антитела к М1 и М5 на клетках Hep-2 не выявляются); клинические ассоциации — первичный билиарный цирроз, лекарственная СКВ (антитела к М3, М6), хронический активный гепатит, синдром Рейнольдса, синдром Шегрена, ревматоидный артрит;
• мелкокрапчатый (цитоплазматический) тип — АТ к различным цитоплазматическим белкам, например, SPR (signal recognition particle — частица, распознающая сигнал); клинические ассоциации — миозит;
• перинуклеарный тип — АТ к антигенам Jo-7, PL1, PL7, PL12; клинические ассоциации — полимиозит, в основном в сочетании с соединительнотканным заболеванием легких; дерматомиозит;
• рибосомальный тип — АТ к антигенам рибосом; клинические ассоциации — СКВ, в основном с неврологической симптоматикой, ревматоидный артрит, синдром Шарпа;
• актин — АТ к актину (антитела к гладкой мускулатуре); клинические ассоциации — хронический активный гепатит, первичный билиарный цирроз;
• тубулин — АТ к тубулину; клинические ассоциации — алкогольный цирроз, тиреоидит Хашимото, склеродермия, синдром CREST, феномен Рейно;
• цитокератин — АТ к цитокератину; клинические ассоциации — ревматоидный артрит, склеродермия, СКВ.

У здоровых лиц моложе 60 лет следует ожидать отрицательных результатов на антитела к компонентам ядра и цитоплазмы; в низком титре (слабоположительный результат) эти антитела все же обнаруживаются у 2-3% (по некоторым данным, до 10%) практически здоровых людей, однако никогда нельзя предсказать, не разовьется ли у этих людей аутоиммунное заболевание в будущем (так, по данным некоторых авторов, антитела к ДНК начинают выявляться задолго до начала клинических проявлений СКВ, латентный период может продолжаться годами). После  60 лет частота слабоположительных результатов с возрастом постоянно растет. Клиническая значимость этих результатов остается неясной; как правило, они выявляются только в первичном (скрининговом) разведении 1:40. Исходя из этого, при выявлении положительного результата в скрининговом титре 1:40 всегда необходимо титрование, как минимум до диагностического титра 1:80. В любом случае представляется целесообразным последующее регулярное клинико-лабо­ра­торное наблюдение лиц, у которых выявлены ANA в низком титре.

ОГРАНИЧЕНИЯ МЕТОДА Положительный результат предполагает наличие определенных заболеваний (см. ниже), однако, как и результат любых лабораторных исследований, может нуждаться в подтверждении или уточнении с помощью других методов, а также в установлении клинико-лабораторных корреляций.

Надо иметь в виду, что различные лекарственные препараты могут вызывать образование аутоантител (гидралазин, прокаинамид, фенитоин, карбамазепин, изониазид, хлорпромазин, пеницилламин, леводофа, пенициллин, фенилбутазон, пероральные контрацептивы, хинидин).

Наиболее частыми мишенями для этих ятрогенных аутоантител являются ядерные гистоны, что приводит к развитию гомогенного или гомогенного периферического типа свечения.

• Системные поражения соединительной ткани:

1. — системная красная волчанка (СКВ), — ревматоидный артрит,- синдром Шегрена, — склеродермия,- дерматомиозит,
2. — узелковый периартериит и др.

   ;

• Инфекции (туберкулез, инфекционный мононуклеоз, острый и особенно хронический вирусный гепатит, подострый инфекционный эндокардит, ВИЧ-инфекция и др.);
• Хронический аутоиммунный гепатит, первичный билиарный цирроз печени;
• Сахарный диабет (инсулинзависимый); 
• Множественный склероз; 
• Легочной фиброз;
• Системные васкулиты.

Антинуклеарные антитела также могут выявляться при острых и хронических лейкозах, приобретенной гемолитической анемии, болезни Вальденстрема, малярии, хронической почечной недостаточности, тромбоцитопениях, лимфопролиферативных заболеваниях, миастении и тимомах.

Титры антинуклеарных антител при узелковом периартериите могут достигать 1:100, при дерматомиозите — 1:500, СКВ — 1:1000 и выше.

При СКВ тест на выявление антинуклеарных антител методом непрямой иммунофлюоресценции обладает высокой степенью чувствительности (до 98% по данным разных авторов), но умеренной специфичностью (78%), так как антинуклеарные антитела могут встречаться и при других, указанных выше, заболеваниях.

Для сравнения, тест определения антител к нативной ДНК с помощью ИФА в диагностике СКВ обладает значительно меньшей чувствительностью — 38% (т.к.

патогенетическую роль в развитии СКВ могут играть не только антитела к ДНК, но и антитела к гистонам, дезоксирибонуклеопротеину и многим другим ядерным антигенам); однако специфичность определения антител к нативной ДНК для диагноза СКВ является почти абсолютной (98%).

Клиническая интерпретация этих различий в чувствительности и специфичности разных лабораторных тестов в диагностике СКВ выглядит следующим образом: отрицательный результат обнаружения антител к нативной ДНК с помощью ИФА не исключает диагноз СКВ, обнаружение же этих антител практически со 100% вероятностью подтверждает диагноз.

Другая ситуация имеется в отношении АНФ: отрицательный (особенно многократный) результат обнаружения антинуклеарных антител методом непрямой иммунофлюоресценции делает диагноз СКВ (во всяком случае, активной формы) весьма сомнительным (т.к. метод обнаруживает практически все аутоантитела, встречающиеся при СКВ), обнаружение же антинуклеарных антител не всегда будет достаточным основанием для постановки диагноза СКВ, оно подтверждает наличие феномена аутоиммунитета и обычно требует для установления окончательного диагноза дальнейшей клинико-лабораторной дифференциации с учетом типа свечения, титра антител, проведения дополнительных уточняющих или подтверждающих тестов, рекомендованных лабораторией, сопоставления результатов с клинической картиной.

При СКВ корреляция между величиной титра ANA и клиническим состоянием обычно отсутствует, хотя сохранение высоких титров в течение длительного времени является неблагоприятным прогностическим признаком.

Снижение уровня антител предвещает ремиссию, но иногда — летальный исход (феномен потребления антител: при нарастающем аутоиммунном повреждении тканей темп высвобождения ядерных антигенов, с которыми связываются наработанные антиядерные антитела, превышает скорость синтеза новых аутоантител).

При склеродермии частота выявления антител к ядерным антигенам составляет 60-80%, их титр обычно ниже, чем при СКВ. При ревматоидном артрите часто встречаются СКВ-подобные формы течения, поэтому довольно часто выявляются ANA.

При дерматомиозите антитела к ядерным антигенам в крови встречаются в 20-60% случаев, при узелковом периартериите — в 17% (титр до 1:100), при болезни Шегрена — в 56% в сочетании с артритом и в 88% случаев — при комбинации с синдромом Гужеро-Шегрена.

При дискоидной (кожной) красной волчанке антинуклеарный фактор выявляется у 50% больных.

Частота обнаружения антинуклеарных антител при ревматическихзаболеваниях и у здоровых лиц (Насонова В.А. и др., 1997)

Заболевание	Частота выявления ANA, %	Титры
СКВ — активная форма	98-100	+++
Дискоидная красная волчанка	40	++, +++
Лекарственная волчанка	100	++
Системная склеродермия	70	++, +++
Синдром Шегрена	60	++, +++
Смешанное заболевание соединительной ткани	100	++, +++
Болезнь Рейно	60	++, +++
Ревматоидный артрит	40	+, ++
Ювенильный хронический артрит	20	+, ++
Полимиозит и дерматомиозит	30	+
Узелковый периартериит	17	+
Здоровые лица до 40 лет	3	+
Здоровые лица после 40 лет	25	+

Антинуклеарные антитела — Анализы в медицинском центре ЛабСтори, запись на прием к врачу онлайн

Антинуклеарные антитела (АНА) — это группа аутоантител (антител к своим собственным тканям), которые реагируют с компонентами ядер клеток. Известно более 100 видов этих антиядерных антител, по структуре они относятся к белкам класса иммуноглобулинов: IgG, IgM, IgA.

Антитела вырабатываются к нуклеиновым кислотам и различным растворимым белковым компонентам ядра: гистонам, мембране ядра, сплайсосомам, ядрышкам, центромерам и рибонуклеопротеинам.

Заболевания, при которых иммунная система реагирует на свои белки, как на чужеродные, называются аутоиммунными патологиями. Тест на антиядерные антитела назначается для их диагностики.

АНА находят более, чем у 90% больных системной красной волчанкой, рассеянным склерозом, аутоиммунным гепатитом, аутоиммунным панкреатитом, первичным билиарным циррозом и другими системными заболеваниями соединительной ткани.

Большинство антинуклеарных антител образуются в ответ на разрушение клеток, когда компоненты ядер становятся доступными для распознавания иммунной системой. В норме этого не происходит, так как иммунные клетки (макрофаги) уничтожают только разрушенные клетки и не передают информацию о них лимфоцитам.

Соединение «антитело и антиген» (компонент ядра) называется иммунным комплексом. Эти комплексы откладываются в стенках сосудов и тканях органов (кожа, почки, мозг, суставные поверхности и др.), что вызывает воспалительную реакцию и повреждение тканей.

В некоторых случаях антинуклеарные антитела образуются при разрушении клеток из-за другой болезни (опухоли, инфекции) или под действием ряда лекарственных препаратов. Но обычно количество таких антител низкое и они не долго циркулируют в крови.

Как подготовиться к анализу

Для исследования на АНА нужна венозная кровь.

Правила подготовки к исследованию:

• рекомендуем сдавать кровь в период — с 8 до 11 утра;
• кровь нужно сдавать натощак, после 8-12 часового ночного периода голодания;
• накануне исследования — легкий ужин с ограничением приема жирной пищи;
• в день сдачи анализов можно пить воду без газа и лучше исключить кофе и чай;
• за 24 часа до исследования исключить алкогольные напитки;
• за 1 час до исследования лучше воздержаться от курения;
• за 24 часа до исследования исключить применение лекарственных препаратов (по согласованию с лечащим врачом);
• за 24 часа до исследования исключить эмоциональный и физический стресс;
• не следует сдавать кровь после проведения рентгенографии, УЗИ, массажа, эндоскопических и физиотерапевтических процедур;
• перед сдачей крови рекомендуется в течение 10-20 минут отдохнуть.

Показания для назначения анализа

Рекомендовать анализ АНА врач может при:

• признаках аутоиммунного процесса: стойкая лихорадка неизвестного происхождения, слабость, суставные и мышечные боли, высыпания на коже, поражение сердца, сосудов, почек, легких;
• обследовании людей с наследственной предрасположенностью аутоиммунным заболеваниям;
• контроле за лечением болезней соединительной ткани при установленном диагнозе.

Значение результатов анализа

Тест на антинуклеарные антитела проводится в виде:

При скрининговом исследовании положительный результат говорит о наличии у пациента какого-то заболевания соединительной ткани. Этот тест проводится при первичном обращении пациента. При отрицательном результате полностью исключить аутоиммунный процесс невозможно.

Иммуноблотинг показывает, какие виды антител преобладают, их сочетания. Такое исследование крови более сложное и дорогостоящее, но оно помогает точнее установить причину роста АНА в крови.

О чем говорит появление антинуклеарных антител в организме

Наличие антинуклеарных антител указывает на развитие в организме аутоиммунных патологий:

• ревматоидный артрит;
• системная склеродермия;
• узелковый периартериит;
• системная красная волчанка;
• дерматомиозит, полимиозит;
• синдром Шегрена;
• миастения;
• смешанное заболевание соединительной ткани.

Менее выраженное повышение антинуклеарных антител характерно для:

• других болезней аутоиммунной природы: сахарный диабет 1 типа, болезнь Базедова, тиреоидит Хашимото;
• инфекций: туберкулез, бактериальный эндокардит, туберкулез, вирусный гепатит;
• опухолей легких и печени;
• легочного фиброза, печеночного цирроза;
• приема ингибиторов АПФ, некоторых противосудорожных препаратов, противотуберкулезных средств, лития, препаратов, снижающих холестерин.